凍(dòng)幹(gān)樣品的(dí)保存(cún)期與(yǔ)樣品的含(hán)水(shuǐ)量也(yě)就是水(shuǐ)分含(hán)量(liáng)有顯著(zhù)的(dí)關係(xì)，含水量越(yuè)高(gāo)，反(fǎn)應(yīng)越劇烈，保(bǎo)存期越(yuè)短，越(yuè)容易發生變性(xìng)，水(shuǐ)解(jiě)氧(yǎng)化等(děng)各種反應。因此控製(zhì)凍幹(gān)樣品的(dí)含(hán)水量(liáng)非(fēi)常關鍵，測(cè)定含(hán)水(shuǐ)量是嚴重我們凍幹工藝的一個重要(yào)手(shǒu)段(duàn)。測(cè)試含水量的(dí)方法(fǎ)有(yǒu)：費(fèi)休(xiū)氏法(fǎ)，加熱失重(zhòng)法，減壓幹燥法(fǎ)等。其(qí)中基於費(fèi)休氏法(fǎ)的方法(fǎ)包括容(róng)量滴(dī)定(dìng)法和(hé)庫倫滴定法(fǎ)。IVD凍幹樣(yàng)品由(yóu)於樣品含量(liáng)比較少(shǎo)，大部分(fēn)都(dū)是微(wēi)升(shēng)級(jí)別(bié)，適(shì)合(hé)費休氏法(fǎ)。製藥行業凍幹(gān)樣品測(cè)量(liáng)含水量相對精準也是(shì)采用此法(fǎ)。
引(yǐn)用(yòng)藥(yào)典(diǎn)中的容量滴(dī)定法。
本法(fǎ)是根(gēn)據(jù)碘和二氧(yǎng)化(huà)硫在吡(pǐ)啶(dìng)和甲醇溶(róng)液(yè)中與(yǔ)水定(dìng)量反應(yīng)的原(yuán)理來測(cè)定水(shuǐ)分(fēn)。所(suǒ)用儀(yí)器應幹(gān)燥(zào)，並能(néng)避免(miǎn)空氣(qì)中(zhōng)水(shuǐ)分的侵(qīn)入(rù)；測定應在幹燥處進行。
費休氏試液的製備與標(biāo)定
（1）製(zhì)備 稱取碘(diǎn)（置硫(liú)酸幹燥器內48小時(shí)以上）110g，置(zhì)幹(gān)燥的具塞錐(zhuī)形(xíng)瓶（或燒瓶(píng)）中(zhōng)，加無水(shuǐ)吡啶(dìng)160ml，注(zhù)意(yì)冷卻，振(zhèn)搖至碘(diǎn)全部溶解，加無(wú)水甲(jiǎ)醇(chún)300ml，稱(chēng)定重量，將錐形(xíng)瓶(píng)（或燒瓶）置冰浴中冷(lěng)卻(què)，在避(bì)免(miǎn)空(kōng)氣(qì)中(zhōng)水(shuǐ)分(fēn)侵入(rù)的條(tiáo)件下(xià)，通入幹燥(zào)的(dí)二氧化(huà)硫(liú)至重量增(zēng)加72g，再(zài)加無(wú)水甲醇(chún)使成1000ml，密塞，搖匀(yún)，在暗處放(fàng)置24小(xiǎo)時。
也可以使(shǐ)用穩定的(dí)市售費(fèi)休氏試液。市(shì)售的費(fèi)休(xiū)氏(shì)試(shì)液可(kě)以(yǐ)是(shì)不(bù)含吡(pǐ)啶(dìng)的其(qí)他(tā)鹼化(huà)試(shì)劑，或(huò)不含甲醇的(dí)其他伯醇(chún)類等製(zhì)成；也(yě)可以(yǐ)是單一(yī)的(dí)溶液或(huò)由兩種溶液臨用(yòng)前混合而(ér)成(chéng)。
本試液應(yīng)遮光，密封，陰涼(liáng)幹(gān)燥處保(bǎo)存(cún)。臨用(yòng)前應標(biāo)定滴(dī)定(dìng)度(dù)。
（2）標定 精密稱(chēng)取純化水10～30mg，用水分(fēn)測定(dìng)儀直(zhí)接標(biāo)定；或(huò)精(jīng)密(mì)稱(chēng)取純化水(shuǐ)10～30mg，置幹(gān)燥(zào)的具(jù)塞(sāi)錐(zhuī)形瓶中(zhōng)，除(chú)另(lìng)有規(guī)定外，加無(wú)水甲(jiǎ)醇(chún)適量(liáng)，在(zài)避免(miǎn)空氣(qì)中水分侵入(rù)的條(tiáo)件下(xià)，用費休氏試液滴(dī)定(dìng)至(zhì)溶(róng)液由淺(qiǎn)黃(huáng)色變為(wéi)紅棕色，或(huò)用(yòng)電化學(xué)方(fāng)法［如(rú)永(yǒng)停(tíng)滴定法（通則(zé)0701）等］指示(shì)終(zhōng)點；另(lìng)做空(kōng)白(bái)試驗，按(àn)下(xià)式(shì)計(jì)算(suàn)：
F=W/(A-B)
式中 F為每1ml費(fèi)休(xiū)氏(shì)試(shì)液相當於水的重量，mg；
W為(wéi)稱取純(chún)化水(shuǐ)的重(zhòng)量(liáng)，mg；
A為滴定所(suǒ)消(xiāo)耗費(fèi)休氏試液(yè)的(dí)容積，ml；
B為空白(bái)所消(xiāo)耗(hào)費休(xiū)氏(shì)試液的(dí)容積(jī)，ml。
測定法(fǎ) 精(jīng)密稱取供試品適量（約消耗(hào)費休(xiū)氏(shì)試(shì)液1～5ml），除(chú)另有規(guī)定外(wài)，溶(róng)劑為無(wú)水甲醇(chún)，用(yòng)水分測(cè)定儀直接測(cè)定。或(huò)精(jīng)密稱取供試品適(shì)量(liáng)，置幹燥的具塞錐(zhuī)形(xíng)瓶中(zhōng)，加(jiā)溶劑(jì)適量，在不(bù)斷振搖(yáo)（或(huò)攪拌）下(xià)用(yòng)費(fèi)休氏(shì)試液滴(dī)定至溶(róng)液由淺黃(huáng)色變(biàn)為(wéi)紅(hóng)棕(zōng)色(sè)，或用(yòng)永停滴定法(fǎ)（通則(zé)0701）指(zhǐ)示(shì)終(zhōng)點；另做空白(bái)試驗(yàn)，按下式計算：
供(gōng)試(shì)品(pǐn)水分含(hán)量（%）=（A-B)*F/W*100%
式中(zhōng) A為供試品(pǐn)所(suǒ)消(xiāo)耗費(fèi)休氏試(shì)液的體積(jī)，ml；
B為空(kōng)白(bái)所(suǒ)消(xiāo)耗費(fèi)休氏試液的(dí)體積(jī)，ml；
F為每1ml費(fèi)休(xiū)氏(shì)試液相當於水的重(zhòng)量(liáng)，mg；
W為供(gōng)試(shì)品(pǐn)的(dí)重量(liáng)，mg。
如(rú)供試(shì)品(pǐn)吸(xī)濕性較強(qiáng)，可稱取(qǔ)供(gōng)試品適(shì)量(liáng)置(zhì)幹燥(zào)的(dí)容器(qì)中，密封（可在幹(gān)燥(zào)的(dí)隔(gé)離箱中操(cāo)作(zuò)），精密稱(chēng)定(dìng)，用(yòng)幹(gān)燥的(dí)注(zhù)射器注(zhù)入適(shì)量無水甲醇(chún)或(huò)其他適宜溶(róng)劑，精密(mì)稱(chēng)定總重量，振搖使(shǐ)供試(shì)品溶解，測定該溶液水(shuǐ)分。洗(xǐ)淨並烘幹(gān)容器(qì)，精密(mì)稱(chēng)定(dìng)其(qí)重(zhòng)量。同時測(cè)定(dìng)溶劑的水分。按(àn)下式(shì)計(jì)算：
供(gōng)試(shì)品(pǐn)水分含(hán)量(liáng)（%）=[(W1-W3)c1-(W1-W2)c2]/(W2-W3)*100%
式(shì)中(zhōng) W1為(wéi)供試(shì)品(pǐn)，溶(róng)劑(jì)和容器(qì)的重(zhòng)量(liáng)，g；
W2為(wéi)供試(shì)品，容器的重量，g；
W3為容器的(dí)重量，g；
c1為(wéi)供試(shì)品(pǐn)溶(róng)液的水分(fēn)含(hán)量(liáng)，g/g；
c2為溶(róng)劑(jì)的水分含(hán)量，g/g。
對熱穩(wěn)定的供(gōng)試品，亦可(kě)將(jiāng)水(shuǐ)分(fēn)測定儀(yí)和市售卡氏(shì)幹(gān)燥(zào)爐聯用(yòng)測定水分。即(jí)將(jiāng)一定量(liáng)的供(gōng)試(shì)品(pǐn)在幹燥(zào)爐(lú)或樣品(pǐn)瓶中加(jiā)熱，並用幹燥氣(qì)體(tǐ)將蒸(zhēng)發(fā)出的(dí)水(shuǐ)分(fēn)導(dǎo)入(rù)水(shuǐ)分測(cè)定儀中(zhōng)測(cè)定。
