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熒光定(dìng)量PCR的凍幹(gān)(一)

更新時(shí)間:2020-04-28 點擊次(cì)數:3843

熒(yíng)光(guāng)定量PCR和普通PCR相(xiāng)比(bǐ)由(yóu)於具有很多(duō)優點,所以(yǐ)目前對熒(yíng)光(guāng)pcr的(dí)研究很(hěn)火。熒光(guāng)PCR的優點包(bāo)括:1,可(kě)以高(gāo)靈敏檢測單個(gè)細(xì)胞(bāo)。2,高特(tè)異(yì)性和精確(què)性 ,將DNA雜(zá)交的(dí)高特(tè)異(yì)性和光譜技術的高(gāo)精準性(xìng)融(róng)合(hé),應(yīng)用熒光探針(zhēn)和(hé)光電傳導(dǎo),直接探測基因(yīn)擴(kuò)增(zēng)過程中(zhōng)熒光信號(hào)的變化(huà),以(yǐ)獲得定(dìng)量(liáng)結(jié)果,相(xiāng)當於(yú)在PCR反應(yīng)過(guò)程中(zhōng)自道動(dòng)完(wán)成了(liǎo)Northern雜(zá)交;3,操作版簡(jiǎn)便,速度快 。通過計算機和分析(xī)軟(ruǎn)件實現PCR擴增(zēng),產物檢測和(hé)定量(liáng)分析(xī)一(yī)體(tǐ)化;4,安(ān)全,無汙染。 FQ-PCR在(zài)全(quán)封(fēng)閉狀(zhuàng)態下(xià)進(jìn)行(háng)PCR擴(kuò)增和(hé)產(chǎn)物分(fēn)析(xī),杜(dù)絕了(liǎo)傳統PCR開放檢(jiǎn)測對(duì)環境的(dí)汙(wū)染和(hé)由此(cǐ)導致的(dí)假權陽性(xìng);5,結果(guǒ)觀(guān)測重(zhòng)復(fù)性(xìng)好(hǎo)。 一起(qǐ)在綫實時觀(guān)測,結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)直(zhí)觀,避(bì)免人為因素(sù)幹(gān)擾(rǎo)。

熒(yíng)光(guāng)定(dìng)量(liáng)PCR雖然具(jù)有很多(duō)優點,但是熒(yíng)光定(dìng)量(liáng)PCR擴增(zēng)反應(yīng)試(shì)劑(jì)在保(bǎo)存,運輸和(hé)使(shǐ)用(yòng)過程中(zhōng)要求在低溫(wēn)條(tiáo)件下(xià)進行,否(fǒu)則(zé)診斷試劑(jì)容易失(shī)效(xiào),因此試劑盒(hé)的長期保(bǎo)存和長途(tú)運輸將會(huì)受(shòu)到很(hěn)大(dà)的限製(zhì),容易(yì)因(yīn)診斷試劑保(bǎo)存(cún)溫度不當(dāng)而使(shǐ)其(qí)敏(mǐn)感(gǎn)性下(xià)降甚(shèn)至*失(shī)效,終(zhōng)導致疫(yì)病(bìng)的檢測(cè)不(bù)及時而(ér)造成疫(yì)病(bìng)流行(háng)。目(mù)前,針對核(hé)酸(suān)擴增反應試劑(jì)缺少(shǎo)能(néng)在(zài)4℃或室溫(wēn)長(cháng)期(qī)保(bǎo)存(cún)的方法。因而(ér)凍幹法(fǎ)逐步(bù)應用(yòng)在(zài)熒(yíng)光定量PCR試(shì)劑上(shàng)。

冷凍幹(gān)燥(zào)是把(bǎ)試劑(jì)預(yù)*行降(jiàng)溫(wēn)凍結成固(gù)體(tǐ),然後在真空(kōng)條(tiáo)件(jiàn)下升華,將95%以 上(shàng)的(dí)水分(fēn)蒸(zhēng)發(fā)掉,而保護劑作為固(gù)劑(jì)在升(shēng)華(huá)時(shí)不會(huì)崩(bēng)塌,保證(zhèng)了凍(dòng)幹(gān)製(zhì)品的形態。整(zhěng)個過(guò)程 在低溫中進行,試(shì)劑活性不會受(shòu)到影(yǐng)響。凍(dòng)幹試(shì)劑有著(zhuó)常溫(wēn)穩(wěn)定,擺(bǎi)脫冷鏈,即(jí)時活(huó)化,不(bù)相(xiāng)容試(shì)劑共(gòng)存(cún),無交叉汙(wū)染等(děng)很(hěn)多(duō)明(míng)顯(xiǎn)優(yōu)勢,隨著(zhuó)產業(yè)的升級,越來越多(duō)廠家(jiā)嘗試(shì)開發(fā)凍(dòng)幹試(shì)劑。國(guó)內對於凍幹技術研究(jiū)的累(léi)積相對(duì)較(jiào)少,從(cóng)學術(shù)到人(rén)才,都(dū)使得凍幹技術在實際(jì)應用中(zhōng)有較難逾越的(dí)壁壘(lěi)。實際上絕大(dà)部分的試劑(jì)都可(kě)以做成凍幹(gān)的(dí),他(tā)的(dí)風險並不是試(shì)劑本身(shēn),而是錯(cuò)誤的方法和巨大(dà)的時(shí)間(jiān)成本。

熒(yíng)光(guāng)定量PCR是(shì)可(kě)以(yǐ)實現(xiàn)凍幹的(dí)。已經(jīng)有(yǒu)很多(duō)公(gōng)司(sī)生產了凍幹(gān)型(xíng)PCR試(shì)劑(jì),如(rú)犬細小(xiǎo)病毒(CPV)核酸檢測試劑盒(凍幹(gān)型(xíng)/PCR-熒(yíng)光(guāng)探(tàn)針法(fǎ)),All-Ready 熒光(guāng)定量(liáng)RT-PCR試劑(凍幹(gān)),水(shuǐ)痘RT-帶狀(zhuàng)皰疹病毒野生(shēng)株探針(zhēn)法熒光定量PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)等。而國內IVD企業(yè)廣東華銀醫藥(yào)科(kē)技有(yǒu)限(xiàn)公司(sī)推(tuī)出全組份凍(dòng)幹(gān)的“xin型guan狀病毒(dú)2019-nCoV核酸檢測試劑盒(熒(yíng)光PCR法)。從目前來(lái)看(kàn)基(jī)本上大部分診斷試(shì)劑都是(shì)可以(yǐ)通過凍幹(gān)法獲得凍幹試劑(jì)盒的。我公司提(tí)供(gōng)凍(dòng)幹機和凍(dòng)幹技(jì)術(shù)支持,全力支(zhī)持(chí)熒(yíng)光定量PCR試劑的凍(dòng)幹項目。

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